南湖网讯（通讯员丁丹 晓齐）基于CRISPR-Cas9的基因组编辑技术是近年来生命科学领域的革命性技术，也是竞争最激烈的领域之一。近日，我校水稻团队谢卡斌教授课题组阐述了一种利用内含子表达引导RNA的新方法，可广泛地用于Cas9和Cpf1介导的基因组编辑。
为了在生物体内更高效率地表达CRISPR-Cas9技术所需的引导RNA和Cas9两个元件，我校谢卡斌课题组巧妙地“借用”生物体内的内含子剪切系统和tRNA加工系统，将内含子改造为引导RNA的表达平台，并将改造的内含子与Cas9融合为一个基因，实现了Cas9和引导RNA地同步表达。在水稻中同时编辑多个基因的试验结果表明该方法的效率达50%-85%。进一步的研究表明，此技术在提高基因组编辑效率和多位点编辑能力的同时，具有更好的扩展性和灵活性。
此外，本研究也将此方法用于CRISPR-Cpf1系统，并利用Cpf1所特有的crRNA加工活性进一步简化了内含子表达引导RNA的技术。水稻原生质体的试验结果表明，利用内含子表达引导RNA也能使Cpf1的多重基因组编辑的效率提高2-3倍。
本研究利用生物体内已有的RNA加工系统，将内含子“变废为宝”，用来作为构建基因组编辑的工具。由于内含子是组成真核生物基因的基本元件之一，因此该方法有望广泛地用于动植物中，促进CRISPR技术的开发和应用。
近日，相关研究成果以“Engineeringintrons to express RNA guides for Cas9- and Cpf1-mediated multiplex genomeediting”为题发表在Molecular Plant杂志，植科院2015级硕士研究生丁丹和2016级博士研究生陈凯园为论文共同第一作者，谢卡斌教授为通讯作者。相关研究获得了国家转基因重大专项、国家自然科学基金和校自主科技创新基金的资助。
链接：http://www.cell.com/molecular-plant/abstract/S1674-2052(18)30055-8
